基因編輯可精確、有效地操縱生物體基因組的特定目標基因，對生物醫(yī)學(xué)研究、農(nóng)業(yè)育種、制藥業(yè)等發(fā)展至關(guān)重要。近年來，以CRISPR系統(tǒng)為代表的基因編輯工具發(fā)展迅猛，被廣泛的應(yīng)用于動植物基因組編輯。隨著基因編輯技術(shù)不斷的發(fā)展，新的技術(shù)不斷推出，基于CRISPR-Cas9系統(tǒng)開發(fā)的新的引導(dǎo)編輯系統(tǒng)（prime editor，PE）也正在興起，其可突破性的實現(xiàn)在基因組的靶位點處任意堿基替換和小片段精準刪除、插入，是基因組編輯領(lǐng)域的重大變革。目前，PE系統(tǒng)已被成功應(yīng)用于植物基因組編輯，但其仍存在編輯效率普遍較低且不穩(wěn)定的缺點。
2022年3月24日，Nature Biotechnology 雜志發(fā)表了中國科學(xué)院遺傳與發(fā)育生物學(xué)研究所高彩霞團隊聯(lián)合中科院遺傳發(fā)育所曹曉風(fēng)團隊、上海科技大學(xué)黃行許團隊的研究論文“An engineered prime editor with enhanced editing efficiency in plants”。該研究通過篩選包含不同逆轉(zhuǎn)錄酶M-MLV RT變體以及融合不同病毒相關(guān)蛋白的候選PPE系統(tǒng)，開發(fā)出了升級版新型引導(dǎo)編輯器ePPE，其在堿基替換、小片段插入、刪除以及較大片段的插入和刪除等多種編輯類型下編輯效率平均可提高5.8倍，且不增加脫靶及副產(chǎn)物的發(fā)生，并證明ePPE與現(xiàn)有的pegRNA優(yōu)化策略相結(jié)合可進一步提升編輯效率，這一系統(tǒng)的開發(fā)將有望推動引導(dǎo)編輯在農(nóng)業(yè)育種、作物改良等方面的應(yīng)用。
優(yōu)質(zhì)的試劑是科學(xué)研究的利器。該團隊在構(gòu)建pegRNA 和 epegRNA 表達載體時，采用全式金TransStart? FastPfu DNA Polymerase對目的片段進行PCR擴增；并在擴增產(chǎn)物序列測定實驗中使用全式金EasyPure? PCR Purification Kit對擴增產(chǎn)物進行純化。
TransStart? FastPfu DNA Polymeras（AP221）
一款快速PCR的熱啟動高保真DNA聚合酶，克服了普通Pfu酶擴增效率低、產(chǎn)量低和擴增速度慢的缺陷。該產(chǎn)品自上市以來備受客戶喜愛，多次榮登Nature biotechnology、Molecular cell等知名期刊，助力科學(xué)研究。
產(chǎn)品特點：
? 保真性高：是EasyTaq? DNA Polymerase的54倍。
? 擴增速度快：4 kb/min，是普通Pfu酶的8倍。
? 擴增產(chǎn)物為平端，可直接克隆于pEASY?-Blunt系列載體中。
? 基因組DNA片段的擴增 (≤ 15 kb)。
? Plasmid DNA片段的擴增 (≤ 20 kb)。
EasyPure? PCR Purification Kit（EP101）
一款高效的PCR產(chǎn)物、酶切產(chǎn)物的純化試劑盒，利用硅膠膜離心柱特異地吸附DNA，并有效地去除蛋白質(zhì)、有機化合物、無機鹽離子及引物等雜質(zhì)。該產(chǎn)品曾多次榮登Nature biotechnology、Science等知名期刊，助力科學(xué)研究。
產(chǎn)品特點：
? 操作簡單，純化效率高。
? 純化速度快，5分鐘完成純化反應(yīng)。
全式金產(chǎn)品再次登上Nature Biotechnology期刊，證明了大家對全式金產(chǎn)品品質(zhì)和服務(wù)的認可，也完美的詮釋了全式金“品質(zhì)高于一切，精品服務(wù)客戶”的理念。未來，全式金將繼續(xù)秉持“匠心”與“創(chuàng)新”，打造更多精品，助力科學(xué)研究。
使用TransStart? FastPfu DNA Polymeras（AP221）產(chǎn)品發(fā)表的部分文章：
◆ An engineered prime editor with enhanced editing efficiency in plants[J]. Nature Biotechnology, 2021.
◆ Genome-wide specificity of prime editors in plants[J]. Nature Biotechnology, 2021.
◆ Precise, predictable multi-nucleotide deletions in rice and wheat using APOBEC–Cas9[J]. Nature Biotechnology, 2020.
◆ Targeted, random mutagenesis of plant genes with dual cytosine and adenine base editors[J]. Nature biotechnology, 2020.
◆ Prime genome editing in rice and wheat[J]. Nature biotechnology, 2020.
◆ Rationally designed APOBEC3B cytosine base editors with improved specificity[J]. Molecular cell, 2020.
◆ The raphe dopamine system controls the expression of incentive memory[J]. Neuron, 2020.
◆
Taf14 recognizes a common motif in transcriptional machineries and
facilitates their clustering by phase separation[J]. Nature
communications, 2020.
使用EasyPure? PCR Purification Kit（EP101）產(chǎn)品發(fā)表的部分文章：
◆ An engineered prime editor with enhanced editing efficiency in plants[J]. Nature Biotechnology, 2021.
◆ Genome-wide specificity of prime editors in plants[J]. Nature Biotechnology, 2021.
◆ Cytosine, but not adenine, base editors induce genome-wide off-target mutations in rice[J]. Science, 2019.
